• 【發(fā)布單位】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局
• 【發(fā)布文號(hào)】國(guó)食藥監(jiān)注[2006]639號(hào)
• 【發(fā)布日期】2006-12-19
• 【生效日期】2006-12-19
• 【失效日期】--
• 【文件來(lái)源】國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局
• 【所屬類別】政策參考

手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則

手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則

(國(guó)食藥監(jiān)注[2006]639號(hào))





各省,、自治區(qū),、直轄市食品藥品監(jiān)督管理局（藥品監(jiān)督管理局）：



 為科學(xué)規(guī)范和指導(dǎo)藥物研究工作，保證藥物研究質(zhì)量,，國(guó)家局組織制定了《抗HIV藥物非臨床藥效學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,、《手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則》,、《藥物生殖毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》和《細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》等4個(gè)研究技術(shù)指導(dǎo)原則，現(xiàn)予發(fā)布,，請(qǐng)參照?qǐng)?zhí)行,。



 附件：1．抗HIV藥物非臨床藥效學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則?

 2．手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則?

 3．藥物生殖毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則?

 4．細(xì)胞毒類抗腫瘤藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則





 國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局

 二○○六年十二月十九日





手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則



 一、概述



 三維結(jié)構(gòu)的物體所具有的與其鏡像的平面形狀完全一致,，但在三維空間中不能完全重疊的性質(zhì),，正如人的左右手之間的關(guān)系，稱之為手性,。具有手性的化合物即稱為手性化合物,。手性是自然界的一種基本屬性，組成生物體的很多基本結(jié)構(gòu)單元都具有手性,，如組成蛋白質(zhì)的手性氨基酸除少數(shù)例外,，大都是L-氨基酸；組成多糖和核酸的天然單糖也大都是D構(gòu)型,。作為調(diào)節(jié)人類的相關(guān)生命活動(dòng)而起到治療作用的藥物,，如果在參與體內(nèi)生理過(guò)程時(shí)涉及到手性分子或手性環(huán)境，則不同的立體異構(gòu)體所產(chǎn)生的生物活性就可能不同,。手性化合物除了通常所說(shuō)的含手性中心的化合物外,，還包括含有手性軸、手性平面,、手性螺旋等因素的化合物,。在本指導(dǎo)原則中所指的手性藥物主要是指含手性中心的藥物，其它類型的手性藥物也可參考本指導(dǎo)原則的基本要求,。



 手性藥物是指分子結(jié)構(gòu)中含有手性中心（也叫不對(duì)稱中心）的藥物,，它包括單一的立體異構(gòu)體、兩個(gè)以上（含兩個(gè)）立體異構(gòu)體的不等量的混合物以及外消旋體,。不同構(gòu)型的立體異構(gòu)體的生物活性也可能不同,，大致可分為以下幾種情況【1】：



 1）藥物的生物活性完全或主要由其中的一個(gè)對(duì)映體產(chǎn)生。如S-萘普生在體外試驗(yàn)的鎮(zhèn)痛作用比其R異構(gòu)體強(qiáng)35倍,。



 2） 兩個(gè)對(duì)映體具有完全相反的生物活性,。如新型苯哌啶類鎮(zhèn)痛藥-哌西那朵的右旋異構(gòu)體為阿片受體的激動(dòng)劑，而其左旋體則為阿片受體的拮抗劑,。



 3） 一個(gè)對(duì)映體有嚴(yán)重的毒副作用,。如驅(qū)蟲(chóng)藥四咪唑的嘔吐副作用是由其右旋體產(chǎn)生的。



 4） 兩個(gè)對(duì)映體的生物活性不同,，但合并用藥有利,。如降壓藥-萘必洛爾的右旋體為β-受體阻滯劑，而左旋體能降低外周血管的阻力，并對(duì)心臟有保護(hù)作用,；抗高血壓藥物茚達(dá)立酮【2】的R異構(gòu)體具有利尿作用,，但有增加血中尿酸的副作用，而S異構(gòu)體卻有促進(jìn)尿酸排泄的作用,，可有效降低R異構(gòu)體的副作用,，兩者合用有利。進(jìn)一步的研究表明,，S與R異構(gòu)體的比例為1:4或1:8時(shí)治療效果最好,。



 5） 兩個(gè)對(duì)映體具有完全相同的生物活性【3】。如普羅帕酮的兩個(gè)對(duì)映體都具有相同的抗心率失常作用,。



 正是由于手性藥物的不同立體異構(gòu)體在藥效,、藥代及毒理等方面都可能存在差異，美國(guó)FDA在其關(guān)于開(kāi)發(fā)立體異構(gòu)體新藥的政策【4】中要求在對(duì)手性藥物進(jìn)行藥理毒理研究時(shí),，應(yīng)分別獲得該藥物的各立體異構(gòu)體,，進(jìn)行必要的比較研究，以確定擬進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的藥物,。所以手性藥物藥學(xué)研究的主要任務(wù)就是為藥物的篩選與進(jìn)一步研究提供足夠數(shù)量與純度的立體異構(gòu)體。本指導(dǎo)原則是在一般化學(xué)藥物藥學(xué)指導(dǎo)原則的基礎(chǔ)上,，并充分考慮手性藥物的特殊性而起草的,，其目的是為手性藥物的藥學(xué)研究提供一般性的指導(dǎo)。本指導(dǎo)原則中所說(shuō)的手性藥物主要針對(duì)單一的立體異構(gòu)體,、兩個(gè)以上（含兩個(gè)）立體異構(gòu)體組成的不等量混合物,。



 由于手性藥物的研發(fā)是一項(xiàng)探索性很強(qiáng)的工作，情況也比較復(fù)雜,，所以在使用本指導(dǎo)原則時(shí),，還應(yīng)具體問(wèn)題具體分析：在遵循藥品研發(fā)的自身規(guī)律以及手性藥物一般要求的基礎(chǔ)上，根據(jù)所研制藥物的特點(diǎn),，進(jìn)行針對(duì)性的研究,。如采用本指導(dǎo)原則以外的研究手段與方法，則該方法或手段的科學(xué)性和可行性必須經(jīng)過(guò)必要的驗(yàn)證,。



 二,、手性藥物藥學(xué)研究的基本思路



 手性藥物藥學(xué)研究的基本思路為：除了要遵循已有的各項(xiàng)藥學(xué)研究指導(dǎo)原則外，還需要針對(duì)手性藥物的特點(diǎn)進(jìn)行研究,。各項(xiàng)研究的具體要求如下：在原料藥制備工藝研究時(shí),，應(yīng)根據(jù)手性中心的引入方式，采取有效的過(guò)程控制手段,，嚴(yán)格控制手性原料與每步反應(yīng)產(chǎn)物的光學(xué)純度,；在結(jié)構(gòu)確證時(shí)，需根據(jù)化合物本身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，并結(jié)合其制備工藝,、結(jié)構(gòu)確證用對(duì)照品及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)等已有的研究基礎(chǔ),，選擇合適的方式來(lái)證明該藥物的絕對(duì)構(gòu)型；在選擇制劑的劑型,、處方與工藝時(shí),，應(yīng)注意保持手性藥物構(gòu)型的穩(wěn)定，不產(chǎn)生構(gòu)型變化,；質(zhì)量研究時(shí),，應(yīng)結(jié)合工藝與各手性中心的穩(wěn)定性確定需研究控制的立體異構(gòu)體雜質(zhì)，并注意驗(yàn)證各種手性分析方法的立體專屬性,；在制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí),，應(yīng)綜合各方面的研究數(shù)據(jù)，合理有效地監(jiān)控產(chǎn)品的光學(xué)特性與光學(xué)純度,；在穩(wěn)定性研究時(shí),，應(yīng)設(shè)立靈敏、立體專屬性的光學(xué)純度檢測(cè)指標(biāo),，以監(jiān)測(cè)構(gòu)型的穩(wěn)定性,。



 各項(xiàng)藥學(xué)研究之間也是緊密聯(lián)系、相互印證的,，需要隨時(shí)參考其它研究的結(jié)果,，以使整個(gè)藥學(xué)研究工作更為全面與準(zhǔn)確。下面分別論述各藥學(xué)研究間的關(guān)系：



 （一） 結(jié)構(gòu)確證研究與原料藥制備工藝間的關(guān)系



 對(duì)于通過(guò)化學(xué)合成制備的手性藥物來(lái)說(shuō),，在確證其構(gòu)型時(shí),，應(yīng)充分利用從制備工藝中所獲取的信息，為結(jié)構(gòu)確證提供必要線索,，從而使結(jié)構(gòu)確證研究更容易進(jìn)行,。當(dāng)原料藥中的某一個(gè)手性中心是從起始原料或試劑中引入的，并且在后續(xù)的反應(yīng)過(guò)程中,，該手性中心并未受到影響,，或?qū)κ中灾行臉?gòu)型的影響是明確而定量發(fā)生的，此時(shí),，如果該起始原料或試劑的立體結(jié)構(gòu)是已知的,，根據(jù)已知的原材料立體結(jié)構(gòu)及相關(guān)的制備工藝，通過(guò)經(jīng)典的化學(xué)相關(guān)法即可確證原料藥中該手性中心的構(gòu)型,。



 在鑒定立體異構(gòu)體雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)時(shí),，也可以結(jié)合制備工藝中各步反應(yīng)的機(jī)理與可能的副反應(yīng)來(lái)綜合分析，確定雜質(zhì)的可能結(jié)構(gòu)范圍后,，再選擇針對(duì)性強(qiáng)的結(jié)構(gòu)確證方法加以驗(yàn)證,，以減少雜質(zhì)結(jié)構(gòu)確證研究的工作量,，降低其難度。



 分析確定了在工藝中產(chǎn)生的立體異構(gòu)體或其它雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)后,，還可以幫助我們進(jìn)一步了解反應(yīng)的機(jī)理,，優(yōu)化工藝條件，盡量減少反應(yīng)副產(chǎn)物的生成,。所以雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證反過(guò)來(lái)又可以指導(dǎo)工藝的優(yōu)化,。



 （二） 質(zhì)量研究及標(biāo)準(zhǔn)制訂與其它研究間的關(guān)系



 1. 與制備工藝間的關(guān)系



 質(zhì)量研究時(shí)應(yīng)結(jié)合制備工藝，分析工藝中可能產(chǎn)生的手性雜質(zhì),，確定須在質(zhì)量研究中分析檢測(cè)的目標(biāo)雜質(zhì),，然后根據(jù)這些雜質(zhì)是屬于非對(duì)映異構(gòu)體還是對(duì)映異構(gòu)體，選取合適的分析方法,，并且有針對(duì)性地對(duì)這些雜質(zhì)的檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證,。



 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的控制必須與原材料的源頭控制及生產(chǎn)的過(guò)程控制相結(jié)合才能切實(shí)控制上市產(chǎn)品的質(zhì)量，尤其對(duì)于含多個(gè)手性中心的藥物更是如此,。因?yàn)榱Ⅲw異構(gòu)體的數(shù)量與手性中心的數(shù)目成指數(shù)關(guān)系,，在手性中心較多（一般大于或等于3）時(shí)，僅通過(guò)終產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)來(lái)控制所有的立體異構(gòu)體雜質(zhì),，在技術(shù)上有一定的難度,，有時(shí)甚至做不到。這時(shí)一定要根據(jù)工藝中手性中心的引入方式,，合并采用源頭控制及生產(chǎn)的過(guò)程控制,，來(lái)全面控制產(chǎn)品的光學(xué)純度。這樣既能有效地控制產(chǎn)品的光學(xué)純度,，又能合理地降低終產(chǎn)品質(zhì)控的難度,。



 其次,，通過(guò)了解制備工藝,，可以幫助我們?nèi)嬲莆债a(chǎn)品的質(zhì)量控制情況，分析可能產(chǎn)生的工藝雜質(zhì),，從而在標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行合理的控制,。對(duì)于手性藥物來(lái)說(shuō)，我們可以通過(guò)了解手性中心的引入方式,，分析各種手性雜質(zhì)產(chǎn)生的可能性,，在采用科學(xué)合理的分析方法獲取足夠數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，才能明確在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需控制的各種立體異構(gòu)體雜質(zhì),。



 2. 與穩(wěn)定性研究間的關(guān)系



 首先,，質(zhì)量研究應(yīng)對(duì)穩(wěn)定性研究中采用的手性分析方法進(jìn)行全面的驗(yàn)證工作，以保證分析方法的立體專屬性,。其次,，根據(jù)穩(wěn)定性研究中手性雜質(zhì)的變化情況,，判斷手性藥物的構(gòu)型在各種環(huán)境因素的影響下，以及放置過(guò)程中是否穩(wěn)定,，是否有構(gòu)型變化現(xiàn)象的產(chǎn)生,，從而確定是否需在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制這些手性雜質(zhì)。



 三,、原料藥的制備



 單一的立體異構(gòu)體的制備方式主要有兩種：一是在動(dòng)植物體內(nèi)天然生成或生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的,，再通過(guò)分離提取得到；二是合成或半合成的方式,，其中也包括某一步或幾步反應(yīng)采用生物催化方式,。由于第一種方式的機(jī)制比較復(fù)雜，且除分離提取外,，對(duì)其工藝的控制與通常情況下所采用的合成的方式不同,，故在本節(jié)內(nèi)容中主要針對(duì)第二種方式進(jìn)行闡述，第一種方式也可參考本節(jié)的主要原則,。



 手性藥物作為一類特殊的化學(xué)藥物,，對(duì)其制備工藝的研究首先需要遵循化學(xué)藥物制備工藝研究的指導(dǎo)原則，然后才能考慮其特殊性,。在進(jìn)行制備工藝研究時(shí),，手性藥物的一個(gè)特殊點(diǎn)在于：在研究與制備過(guò)程中需要隨時(shí)關(guān)注手性中心的變化，并控制其光學(xué)純度,?；谑中运幬锏倪@一特點(diǎn)，在研究其制備工藝時(shí),，應(yīng)遵循的一個(gè)重要原則是：對(duì)所有的手性原料與試劑均應(yīng)控制其光學(xué)純度,，引入手性中心后的各反應(yīng)中間體也應(yīng)結(jié)合反應(yīng)機(jī)理，對(duì)可能產(chǎn)生的立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行有效的分離,、控制,。這樣就能與終產(chǎn)品的質(zhì)量控制相結(jié)合，達(dá)到全面控制產(chǎn)品光學(xué)純度的目的,。



 由于手性中心的引入方式不同，在工藝中控制光學(xué)純度的方式也各有不同,，所以下面將根據(jù)手性中心的引入方式分別進(jìn)行闡述：



 （一）直接從起始原料或試劑中引入



 在此情況下,，終產(chǎn)品中的手性中心是從光學(xué)純的起始原料或試劑中引入的，在后續(xù)的制備過(guò)程中,，不再涉及手性中心的構(gòu)型改變,，或涉及到的構(gòu)型改變是可控的。因此,，終產(chǎn)品的光學(xué)純度主要取決于以下兩個(gè)方面：起始原料或試劑的光學(xué)純度,；后續(xù)反應(yīng)過(guò)程是否會(huì)影響到已有的手性中心,，從而產(chǎn)生構(gòu)型變化的可能性及程度。所以在進(jìn)行工藝研究時(shí),，首先要采用立體專屬性的分析方法嚴(yán)格控制起始原料或試劑的光學(xué)純度,，制定合理可行的手性雜質(zhì)的限度。其次要根據(jù)后續(xù)反應(yīng)的機(jī)理,，充分分析后續(xù)反應(yīng)是否會(huì)影響已有手性中心的構(gòu)型,，如可能會(huì)產(chǎn)生影響時(shí)，應(yīng)研究與優(yōu)化工藝條件,，盡量避免或減少構(gòu)型變化的產(chǎn)生,。



 由于在后續(xù)反應(yīng)中存在構(gòu)型變化的可能性，所以,，在制備工藝中僅控制起始原料或試劑的光學(xué)純度是不充分的,，尤其是當(dāng)終產(chǎn)品中存在多個(gè)手性中心，且難以對(duì)終產(chǎn)品中的所有立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行有效控制時(shí),，就需要結(jié)合工藝中的過(guò)程控制來(lái)綜合控制終產(chǎn)品的光學(xué)純度,。這就要求在進(jìn)行工藝研究時(shí)，對(duì)引入手性中心后的每步反應(yīng)的中間體中的立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行檢測(cè),，分析與監(jiān)測(cè)構(gòu)型變化的可能性,。如沒(méi)有發(fā)生構(gòu)型變化，則只需根據(jù)工藝優(yōu)化與驗(yàn)證的結(jié)果,，在制備工藝中嚴(yán)格控制工藝操作參數(shù)即可,；如可能會(huì)發(fā)生部分構(gòu)型變化，則除了需嚴(yán)格控制工藝操作參數(shù)外,，還需采用可靠的指標(biāo)對(duì)中間體的光學(xué)純度進(jìn)行控制,，即對(duì)該步反應(yīng)中間體中的立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行嚴(yán)格的控制。



 總之,，在此種情況下,，除了需對(duì)手性中心引入的源頭――起始原料或試劑進(jìn)行光學(xué)純度控制外，還需根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)控的難度分別采用上述不同的過(guò)程控制方式,，以切實(shí)控制終產(chǎn)品的光學(xué)純度,。



 （二）不對(duì)稱合成



 此種情況是指采用立體選擇性或?qū)傩缘姆磻?yīng)（包括酶催化反應(yīng)）在分子中引入所需構(gòu)型的手性中心,，所以終產(chǎn)品的光學(xué)純度直接取決于該步反應(yīng)的立體選擇性,。為保證所采用方法的立體選擇性，首先應(yīng)盡可能查閱相關(guān)的文獻(xiàn)資料,，充分了解所用不對(duì)稱合成反應(yīng)的反應(yīng)機(jī)理,、反應(yīng)條件、立體選擇性等,，以選取合適的反應(yīng),；其次,，在工藝研究中應(yīng)對(duì)該步不對(duì)稱反應(yīng)的工藝操作參數(shù)進(jìn)行篩選優(yōu)化，并對(duì)產(chǎn)物的立體異構(gòu)體進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)測(cè),，確定該步反應(yīng)的工藝條件與反應(yīng)產(chǎn)物的光學(xué)純度控制指標(biāo),。引入手性中心后，進(jìn)行后續(xù)反應(yīng)時(shí)仍可能產(chǎn)生構(gòu)型變化,，故同樣需要根據(jù)終產(chǎn)品質(zhì)控的難度分別采用不同的過(guò)程控制方式,，來(lái)綜合控制終產(chǎn)品的光學(xué)純度。此外,，不對(duì)稱合成中有可能使用一些毒性較大的催化劑,，在后處理過(guò)程中應(yīng)注意控制其殘留。在質(zhì)量研究中對(duì)這些催化劑的檢測(cè)方法進(jìn)行研究與驗(yàn)證,，并在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)其殘留量進(jìn)行控制,。



 兩個(gè)以上（含兩個(gè)）立體異構(gòu)體組成的不等量混合物的合成主要是通過(guò)不完全的立體選擇性反應(yīng)得到的，此時(shí)在進(jìn)行制備工藝研究時(shí),，其主要任務(wù)是確定合適的工藝參數(shù),，保證能穩(wěn)定地獲得組成固定并符合要求的混合物。



 （三）消旋體的拆分



 此種方式是指采用手性拆分試劑與外消旋的中間體或終產(chǎn)品反應(yīng)生成非對(duì)映異構(gòu)體,，分離純化得到所需的非對(duì)映異構(gòu)體,，再去掉手性拆分試劑，從而得到所需構(gòu)型的手性化合物,。在此工藝中影響終產(chǎn)品的光學(xué)純度的因素有：手性拆分試劑的光學(xué)純度,、分離純化是否完全、拆分及后續(xù)反應(yīng)的構(gòu)型變化,。針對(duì)以上影響因素,，要控制終產(chǎn)品的光學(xué)純度，可采取以下措施：首先應(yīng)采用光學(xué)純度盡可能高的拆分試劑,；其次,，應(yīng)盡量純化與拆分試劑反應(yīng)所得的非對(duì)映異構(gòu)體，因?yàn)檫@是控制成品光學(xué)純度的重要步驟,。在這兩個(gè)措施中,，均應(yīng)采用合適的方法嚴(yán)格控制試劑與產(chǎn)品的光學(xué)純度。



 除此之外,，隨著手性拆分技術(shù)的進(jìn)步,，也可以采用制備型的手性色譜技術(shù)來(lái)直接分離對(duì)映異構(gòu)體，從而得到所需的目標(biāo)化合物,。



 總之,，在手性藥物制備工藝研究中，如果能充分考慮從工藝中對(duì)產(chǎn)品的光學(xué)純度進(jìn)行有效的全程控制,，就能從源頭上控制產(chǎn)品的質(zhì)量,。尤其是當(dāng)終產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)難以全面有效地控制其光學(xué)純度時(shí),，就更應(yīng)該重視制備工藝研究中的過(guò)程控制。



 四,、結(jié)構(gòu)確證



 由于手性藥物具有立體結(jié)構(gòu),，并且在非手性條件下，對(duì)映體一般具有相同的熔點(diǎn),、溶解度,、色譜保留行為、紅外光譜（Infrared Spectroscopy,，IR）,、核磁共振譜（Nuclear Magnetic Resonance，NMR）,，因此手性藥物結(jié)構(gòu)確證具有一定的特殊性,，在進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證時(shí)，除應(yīng)符合結(jié)構(gòu)確證的一般原則外,，還應(yīng)特別注意對(duì)其構(gòu)型進(jìn)行研究與確證,。



 （一）手性藥物結(jié)構(gòu)確證的基本原則



 手性藥物結(jié)構(gòu)確證的總體原則：應(yīng)注意確證手性藥物分子的絕對(duì)構(gòu)型，對(duì)各手性中心的絕對(duì)構(gòu)型是R還是S（或其它的絕對(duì)構(gòu)型表示方式）均應(yīng)確證清楚,。對(duì)于單一的立體異構(gòu)體,，只需確證該分子中各手性中心的絕對(duì)構(gòu)型；而對(duì)于立體異構(gòu)體的混合物,，則需要對(duì)各立體異構(gòu)體的絕對(duì)構(gòu)型及立體異構(gòu)體間的比例進(jìn)行確證,。



 構(gòu)型的確證方法大體分為兩類：直接法與間接法。直接法是指只需通過(guò)某一單一的方法即可確證手性藥物的構(gòu)型,，例如,，單晶X射線衍射法（Single-crystal X-ray Diffraction，SXRD）,；間接法是指僅靠對(duì)待測(cè)物進(jìn)行分析,，尚難以確證其構(gòu)型，而需綜合其它數(shù)據(jù),，如與其同系物的相關(guān)分析數(shù)據(jù)相結(jié)合才能確定待測(cè)物的構(gòu)型,。例如，比旋度,、手性色譜,、核磁共振以及旋光光譜（Optical Rotatory Dispersion，ORD）,、圓二色譜（Circular Dichroism,，CD）等分析方法都屬于間接法,?；瘜W(xué)相關(guān)法也屬于間接法,。



 除下面介紹的儀器分析方法外，也可采用化學(xué)相關(guān)法確證手性藥物的構(gòu)型,。在手性藥物的制備過(guò)程中構(gòu)型的變化是已知的情況下,，根據(jù)起始原料的構(gòu)型、化學(xué)合成方法的立體選擇性以及各中間體的立體結(jié)構(gòu)也可間接獲得最終產(chǎn)品（藥物）的構(gòu)型信息,。該方法在儀器分析方法成熟以前使用較多,。



 在確證手性藥物的結(jié)構(gòu)時(shí)，可采用常規(guī)方法確證藥物的結(jié)構(gòu)式,；然后再根據(jù)手性中心的數(shù)量,、起始原料的構(gòu)型、化學(xué)合成方法的立體選擇性,、文獻(xiàn)數(shù)據(jù),、對(duì)照品等相關(guān)信息，有針對(duì)性地選用比旋度測(cè)定,、手性高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography,，HPLC）或氣相色譜法（Gas Chromatography，GC）,、化學(xué)相關(guān)法,、SXRD、CD,、ORD以及奧氏核效應(yīng)（Nuclear Overhauser Effect,，NOE）差譜等方法對(duì)其絕對(duì)構(gòu)型進(jìn)行確證。因?yàn)楸刃葴y(cè)定相對(duì)比較簡(jiǎn)便,，且與分子的構(gòu)型有一定的相關(guān)性,，所以一般情況下比旋度是必需的檢測(cè)項(xiàng)目之一。



 此外,，在絕對(duì)構(gòu)型的確證中,，為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，除采用一種方法外,，需考慮采用另一種方法加以確認(rèn),。



 （二）手性藥物構(gòu)型確證的主要方法



 下面對(duì)手性藥物構(gòu)型確證的主要方法分別進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹。



 1．X射線衍射法（X-ray Diffraction,，XRD）



 由于單晶X射線衍射法可以獨(dú)立確定分子的絕對(duì)構(gòu)型,，所以在其他相關(guān)信息比較缺乏的情況下，如要確證手性藥物的絕對(duì)構(gòu)型,，建議采用單晶X射線衍射法,。



 單晶X射線衍射法是通過(guò)單色X光源，常用CuKα(1.54178?)與MoKα（0.71073?）對(duì)具有一定幾何尺寸大小（0.01-1.00 mm）的藥物單晶體樣品（由多個(gè)晶胞組成）進(jìn)行X射線衍射實(shí)驗(yàn),，記錄衍射數(shù)據(jù)并經(jīng)相位計(jì)算即可獲得藥物分子立體結(jié)構(gòu)的相關(guān)定量信息,，如藥物分子的相對(duì)或絕對(duì)構(gòu)型以及藥物晶體中存在的結(jié)晶水/溶劑含量與位置等一系列信息。



 通?？刹捎盟膱A衍射儀（低功率光源）,、CCD衍射儀（低功率光源）或IP面探測(cè)儀（高功率光源）進(jìn)行手性藥物分子構(gòu)型的測(cè)定。



 單晶X射線衍射法測(cè)定分子絕對(duì)構(gòu)型包括直接與間接兩種方法：



 直接法：其測(cè)定原理是應(yīng)用不同化學(xué)元素對(duì)X射線的反常散射（色散）效應(yīng),。若待測(cè)藥物樣品僅含有C,、H、N,、O元素時(shí),，應(yīng)使用CuKα輻射，衍射實(shí)驗(yàn)的θ角度不低于57o,；若待測(cè)樣品中含有原子序數(shù)大于10的元素時(shí),，可以應(yīng)用MoKα輻射，衍射實(shí)驗(yàn)的θ角不低于25o,。



 間接法：利用分子結(jié)構(gòu)中部分已知構(gòu)型的基團(tuán)確定分子構(gòu)型,。衍射實(shí)驗(yàn)采用CuKα或MoKα輻射均可。



 應(yīng)注意的是：由于單晶X射線衍射結(jié)構(gòu)分析的對(duì)象僅為待測(cè)樣品中的一顆晶體,，樣品缺少普遍性,，需對(duì)藥物樣品進(jìn)行粉末X射線衍射（Powder X-ray Diffraction，PXRD）實(shí)驗(yàn),，用單晶結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)計(jì)算該構(gòu)型手性藥物的理論粉末X射線衍射圖譜,，并與實(shí)驗(yàn)粉末X射線衍射圖譜比較，當(dāng)二者一致時(shí)即可證明衍射用單晶具有普遍性,，從而確定手性藥物的構(gòu)型,。



 2．圓二色譜



 該項(xiàng)測(cè)試的原理主要是通過(guò)測(cè)定光學(xué)活性物質(zhì)（待測(cè)物）在圓偏振光下的Cotton效應(yīng)，根據(jù)Cotton效應(yīng)的符號(hào)獲得藥物結(jié)構(gòu)中發(fā)色團(tuán)周圍環(huán)境的立體化學(xué)信息,，并與一個(gè)絕對(duì)構(gòu)型已知的與待測(cè)藥物結(jié)構(gòu)相似化合物的Cotton效應(yīng)相比較,，即可能推導(dǎo)出待測(cè)物的絕對(duì)構(gòu)型。



 此外對(duì)于一些具有剛性結(jié)構(gòu)的環(huán)體系的羰基藥物,，通過(guò)比較其Cotton效應(yīng)的符號(hào)并結(jié)合經(jīng)驗(yàn)規(guī)律“八區(qū)律”,，亦可能預(yù)言某些羰基藥物的絕對(duì)構(gòu)型。



 3．旋光光譜



 手性藥物（溶液）在偏振光下存在旋光現(xiàn)象,，其旋光值隨入射偏振光波長(zhǎng)的改變而改變,。在同系物中，相同的化學(xué)反應(yīng)使旋光值按相同的方向改變,，而不改變其旋光的方向,，通過(guò)比較相關(guān)化合物（藥物）的旋光性，可得到手性藥物的相對(duì)構(gòu)型信息。如能得知藥物旋光光譜的可測(cè)范圍,，則在一系列反應(yīng)后,，藥物絕對(duì)構(gòu)型可從用于制備該藥物的底物構(gòu)型推導(dǎo)得到。



 應(yīng)注意的是,，在采用該方法測(cè)定藥物絕對(duì)構(gòu)型時(shí),，應(yīng)與絕對(duì)構(gòu)型已知且與待測(cè)藥物結(jié)構(gòu)相同或相似化合物,，在相同的實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定旋光光譜,，以保證比較結(jié)果的可靠性。



 4．核磁共振法



 4.1 NOE差譜



 通過(guò)對(duì)具有剛性結(jié)構(gòu)（或優(yōu)勢(shì)構(gòu)象）藥物分子中某一質(zhì)子的選擇性照射,，致使與該質(zhì)子在空間上距離較近的相關(guān)質(zhì)子峰強(qiáng)度的增減和相互間偶合作用的消失,，從而推測(cè)出相關(guān)質(zhì)子在空間的相對(duì)位置，進(jìn)而可獲得藥物的構(gòu)型信息,。



 4.2 通過(guò)測(cè)定手性衍生物的NMR來(lái)確定其絕對(duì)構(gòu)型,。



 待測(cè)手性分子與已知構(gòu)型的一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體反應(yīng)，生成兩個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體后,，分別測(cè)定各自分子中氫的化學(xué)位移,，通過(guò)化學(xué)位移的比較，并結(jié)合計(jì)算等方法,，從而推導(dǎo)出該手性分子的絕對(duì)構(gòu)型,。



 例如，Mosher法【5】是將待測(cè)手性醇（或胺）與（R）或（S）-α－甲氧基－α－三氟甲基－α－苯基乙酸（MTPA）反應(yīng)生成相應(yīng)的酯或酰胺,，然后測(cè)定該酯或酰胺的核磁共振氫譜,。由于該方法已事先研究確定了兩種不同構(gòu)型的手性醇（或胺）生成相應(yīng)的酯或酰胺后，手性碳上的氫的化學(xué)位移的變化規(guī)律,，所以根據(jù)實(shí)測(cè)的化學(xué)位移的變化情況即可確定該手性醇（或胺）的絕對(duì)構(gòu)型,。由此可見(jiàn)，這類方法也屬于間接法,，可用于判斷創(chuàng)新藥物的絕對(duì)構(gòu)型,。



 五、制劑處方及工藝



 手性藥物制劑研究的總體目標(biāo)與普通化學(xué)藥物是一致的,，主要研究項(xiàng)目和思路總體上可以參照一般化學(xué)藥進(jìn)行,。對(duì)于手性藥物而言,處方及工藝研究的重點(diǎn)在于保證手性藥物構(gòu)型不變。手性藥物構(gòu)型的穩(wěn)定情況也是手性藥物制劑劑型選擇時(shí)需要考慮的重要因素,，如其穩(wěn)定的pH范圍,，固態(tài)及液態(tài)下構(gòu)型穩(wěn)定情況，對(duì)光,、熱,、空氣等因素的穩(wěn)定情況等。如果研究顯示手性藥物在溶液狀態(tài)下構(gòu)型不夠穩(wěn)定，可發(fā)生構(gòu)型變化,，則不宜選擇注射劑,、口服溶液等液體劑型。



 手性藥物處方篩選及工藝研究的重點(diǎn)是通過(guò)選擇適宜的輔料和工藝條件,，避免引起手性藥物構(gòu)型的轉(zhuǎn)變,。研究中應(yīng)通過(guò)相應(yīng)的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)證明選擇的處方及制備工藝不會(huì)引起手性藥物構(gòu)型的變化。研究驗(yàn)證工作可以在處方篩選和工藝研究過(guò)程中進(jìn)行,，增加對(duì)手性藥物立體異構(gòu)體的考察,，以證明某一處方或某一工藝條件下藥物構(gòu)型的穩(wěn)定。如考察不同pH值的系列處方,，或某一處方滅菌前后藥物立體異構(gòu)體的變化情況等,，從而確定該處方或工藝條件下，手性藥物構(gòu)型的穩(wěn)定情況,。同時(shí),，研究驗(yàn)證工作也可以在確定初步的處方和制備工藝后，在制劑的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)中進(jìn)行,，即對(duì)制劑基本項(xiàng)目考察合格的樣品,，在選擇兩種以上處方樣品進(jìn)行影響因素考察時(shí)，增加考察藥物構(gòu)型的穩(wěn)定情況,，進(jìn)而篩選出相對(duì)合理的處方,。



 六、質(zhì)量研究與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)



 （一）質(zhì)量研究



 1．研究項(xiàng)目的確定



 比旋度,、立體專屬性的鑒別項(xiàng),、立體異構(gòu)體雜質(zhì)檢查以及立體專屬性的含量測(cè)定等是反映藥物立體化學(xué)特征的檢測(cè)項(xiàng)目，在質(zhì)量研究中要綜合考慮藥物研發(fā)的全過(guò)程確定研究項(xiàng)目,。鑒別,、光學(xué)純度檢查和含量測(cè)定等項(xiàng)目的取舍可統(tǒng)籌考慮，如果鑒別和檢查項(xiàng)能夠控制其光學(xué)特征和光學(xué)純度時(shí),，含量測(cè)定可采用非立體專屬性的測(cè)定方法,。



 2．分析方法及其選擇



 分析方法直接關(guān)系到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此,，選擇合適的光學(xué)純度分析方法是手性藥物質(zhì)量研究的首要問(wèn)題,。



 一般情況下，比旋度可按照藥典附錄的要求進(jìn)行研究,，需要注意的是選定的光源等測(cè)定條件應(yīng)使測(cè)得的比旋度數(shù)值適中,，能較靈敏地反映藥物的光學(xué)特性；必要時(shí)除使用通常的鈉燈光源外,，還可選用汞燈等特定光源,。影響比旋度數(shù)值的因素較多,，包括使用的溶劑、測(cè)試液的濃度,、測(cè)定時(shí)的溫度,、產(chǎn)品的化學(xué)純度、光學(xué)純度及儀器數(shù)據(jù)的正常波動(dòng)等,，因此,，該數(shù)值的變化并不一定能靈敏、準(zhǔn)確地反映出立體異構(gòu)體含量的變化,。通常情況下,，僅采用比旋度作為光學(xué)純度的質(zhì)控指標(biāo)是不完善的，該方法需與其它立體專屬性更強(qiáng),、靈敏度更高的分析方法相結(jié)合,，才能較好地控制產(chǎn)品的光學(xué)純度,。天然來(lái)源的具有多個(gè)手性中心的藥物如果難以進(jìn)行立體異構(gòu)體雜質(zhì)的控制,，且試驗(yàn)或文獻(xiàn)數(shù)據(jù)證明其構(gòu)型不易發(fā)生改變時(shí)，可僅用比旋度范圍對(duì)其光學(xué)特性進(jìn)行一定的控制,。



 理論上,，非對(duì)映異構(gòu)體之間可采用非立體專屬性的方法進(jìn)行分離檢測(cè)，故以下僅針對(duì)對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)的檢測(cè)方法進(jìn)行闡述,。從方法的專屬性及靈敏度考慮,，一般多采用手性分離的方法檢測(cè)對(duì)映異構(gòu)體。HPLC,、GC,、毛細(xì)管電泳法（Capillary Electrophoresis，CE）,、超臨界色譜法（Supercritical Fluid Chromatography,，SFC）及薄層色譜法(Thin Layer Chromatography，TLC)在這方面都有研究應(yīng)用,，但以前三者的應(yīng)用較多,。



 色譜法拆分藥物對(duì)映體可分為直接法和間接法兩類。直接拆分法是指不經(jīng)衍生化而直接分離對(duì)映體藥物,，可以分為手性固定相（Chiral Stationary Phase, CSP）法和手性流動(dòng)相添加劑（Chiral Mobile Phase Additive, CMPA）法,。前者是將手性源合成到普通固定相上，形成手性固定相,。雖然手性固定相的制備有一定難度,，且手性柱通用性差、供試品有時(shí)需作柱前衍生化處理等,，但是該法的色譜系統(tǒng)穩(wěn)定性好,、方法重現(xiàn)性較好,、使用方便，所以在手性藥物的研究中應(yīng)用較多,。后者是在流動(dòng)相中加入手性選擇劑而在普通色譜柱上分離手性化合物,，其優(yōu)點(diǎn)是可采用普通的非手性柱、操作簡(jiǎn)便,、分析過(guò)程較少發(fā)生消旋化,；通過(guò)改變CMPA的種類、濃度及流動(dòng)相組成等多種途徑可優(yōu)化分離條件,，并控制出峰順序,。該方法的缺點(diǎn)是其色譜系統(tǒng)穩(wěn)定性較差，平衡時(shí)間較長(zhǎng),，CMPA消耗較多,，某些CMPA欠穩(wěn)定，且有時(shí)干擾檢測(cè),；CMPA有時(shí)需要自行合成,，不如手性固定相法方便。但因其制備難度小于CSP,，在進(jìn)行手性藥物前期研究時(shí),，因不易獲得商品化的CSP，本法仍有較高的應(yīng)用價(jià)值,。間接拆分法主要是指手性試劑衍生化法（Chiral Reagent Derivatization,CRD）,，其原理主要是利用對(duì)映體混合物在預(yù)處理或前置柱中先與高光學(xué)純度的手性衍生化試劑反應(yīng)，生成一對(duì)非對(duì)映體,，然后利用他們?cè)诶砘再|(zhì)上的差異,，在非手性柱（也可用手性柱）上加以分離。此法涉及供試品的化學(xué)轉(zhuǎn)化和分離等預(yù)處理過(guò)程,，有時(shí)可引起某一對(duì)映體組分的消旋化,、損失或富集，且手性衍生化試劑的光學(xué)純度及衍生化反應(yīng)的速率或收率等都會(huì)影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性,，研究中應(yīng)加以關(guān)注,。



 3．分析方法的驗(yàn)證



 方法的驗(yàn)證應(yīng)參照分析方法驗(yàn)證的技術(shù)指導(dǎo)原則，對(duì)于光學(xué)純度檢查方法的驗(yàn)證,，立體專屬性是考察的重點(diǎn),。立體專屬性系指在其它手性雜質(zhì)可能共存的情況下，采用的方法能正確測(cè)定出被測(cè)物的特性,。



 方法專屬性的驗(yàn)證,，可采用消旋體或與對(duì)映異構(gòu)體混和進(jìn)樣的方式考察對(duì)映體間的分離度。同時(shí)需要考慮產(chǎn)品中其它有關(guān)物質(zhì)對(duì)異構(gòu)體檢測(cè)的影響,，可采用各步反應(yīng)的中間體（尤其是后幾步反應(yīng)的中間體）,、粗品來(lái)進(jìn)行系統(tǒng)適用性研究,，考察各雜質(zhì)與各立體異構(gòu)體峰相互間的分離度是否符合要求。另外,，還可用酸,、堿、光,、熱,、氧化等適度破壞試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證該方法能否避免降解物對(duì)對(duì)映體檢測(cè)的干擾。一般情況下,，其它有關(guān)物質(zhì)的檢查已有專門(mén)項(xiàng)目進(jìn)行控制,，如有必要，可通過(guò)選擇檢測(cè)波長(zhǎng)等方法避免其它有關(guān)物質(zhì)對(duì)異構(gòu)體檢測(cè)的干擾,。



 4．定量方式



 定量方式一般有峰面積歸一化法,、主成分自身對(duì)照法、異構(gòu)體雜質(zhì)對(duì)照品法,。



 因?yàn)閮蓪?duì)映體的紫外吸收特性相同,，如果主成分與其異構(gòu)體含量或定量限在同一線性范圍，采用峰面積歸一化法定量更為簡(jiǎn)便,、快捷,；否則,，可采用主成分自身對(duì)照法,。當(dāng)使用異構(gòu)體雜質(zhì)對(duì)照品法時(shí)，應(yīng)注意對(duì)該對(duì)照品的制備工藝和構(gòu)型進(jìn)行詳細(xì)研究,，并制訂其質(zhì)量要求,。



 （二）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)



 1. 手性藥物光學(xué)純度控制的原則



 手性藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的構(gòu)成與化學(xué)藥物基本相同，特點(diǎn)是質(zhì)控項(xiàng)目要體現(xiàn)其光學(xué)特征的質(zhì)量控制,。在手性藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂過(guò)程中,，需要緊密結(jié)合制備工藝，確定針對(duì)性的質(zhì)控項(xiàng)目,，以有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量,。制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)要根據(jù)對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)的生物活性（毒性）、原料藥的制備工藝（生產(chǎn)中的過(guò)程控制,、生產(chǎn)的可行性及批與批之間的正常波動(dòng)）,、制劑工藝（制劑過(guò)程中是否發(fā)生構(gòu)型轉(zhuǎn)化）、穩(wěn)定性考察（貯藏過(guò)程中是否發(fā)生構(gòu)型轉(zhuǎn)化）等的研究結(jié)果及批次檢測(cè)結(jié)果來(lái)確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需控制的立體異構(gòu)體及其限度,。需控制的立體異構(gòu)體雜質(zhì)應(yīng)根據(jù)上述研究的結(jié)果加以確定,，限度的確定則應(yīng)首先考慮雜質(zhì)的安全性。一般情況下,，生物活性較強(qiáng)的對(duì)映體雜質(zhì),，需根據(jù)研究結(jié)果嚴(yán)格控制其限度,。在上市消旋體藥物基礎(chǔ)上研發(fā)的單一對(duì)映體藥物，經(jīng)臨床驗(yàn)證其對(duì)映體雜質(zhì)的毒副作用相對(duì)較小時(shí),，限度可適當(dāng)放寬,。非對(duì)映體雜質(zhì)如能采用普通色譜方法進(jìn)行檢測(cè)，可按一般有關(guān)物質(zhì)加以控制,；毒副作用較大時(shí),，需單獨(dú)控制其限度。



 2．質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂



 2.1原料藥



 【性狀】項(xiàng)下的比旋度是手性藥物的特征之一,，可以說(shuō)明藥品的光學(xué)特征（旋光方向）和大致純度,。一般不宜單獨(dú)用以控制產(chǎn)品的光學(xué)純度，需要與檢查項(xiàng)下的異構(gòu)體檢查項(xiàng)相互補(bǔ)充,，以較好地控制產(chǎn)品質(zhì)量,。對(duì)于含多個(gè)手性中心的藥物，如難以在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)所有可能產(chǎn)生的立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行直接控制時(shí),，可用比旋度范圍作為其光學(xué)特征和純度的粗略控制方法,。此時(shí)，由于該方法的局限性,，需與嚴(yán)格的生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制相結(jié)合,，并在充分考察產(chǎn)品質(zhì)量的基礎(chǔ)上，制訂比旋度的范圍,。



 【鑒別】項(xiàng)目的設(shè)立需要根據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的整體情況綜合加以考慮,。已制訂比旋度檢查或立體異構(gòu)體檢查項(xiàng)時(shí)，可不考慮鑒別方法的立體專屬性,；否則,，需要制訂反映藥物光學(xué)特征的鑒別方法。



 【檢查】項(xiàng)下立體異構(gòu)體的檢查是手性藥物重要的質(zhì)控項(xiàng)目之一,。對(duì)于單一對(duì)映體藥物或兩對(duì)映體以一定比例組合給藥的藥物,，須制訂立體異構(gòu)體檢查項(xiàng)，以控制立體異構(gòu)體雜質(zhì)或兩對(duì)映體的比例組成,；含兩個(gè)手性中心以下的單一對(duì)映體藥物,，一般需要對(duì)生產(chǎn)與貯藏過(guò)程中可能產(chǎn)生的各立體異構(gòu)體雜質(zhì)分別制訂限度要求；含多個(gè)（2個(gè)以上）手性中心的單一對(duì)映體藥物,，由于建立分析方法難度較大,，可在獲得充分的安全性信息基礎(chǔ)上，結(jié)合制備工藝的具體情況,、過(guò)程控制措施與穩(wěn)定性考察的結(jié)果,，僅對(duì)生產(chǎn)與貯藏過(guò)程中產(chǎn)生的及毒性（生物活性）較大的立體異構(gòu)體雜質(zhì)作單獨(dú)控制。



 目前情況下,，手性色譜法是手性藥物立體異構(gòu)體檢查常用而有效的方法,，但該方法不能直接反映藥物的光學(xué)特征,，需要與性狀項(xiàng)下的比旋度測(cè)定相互補(bǔ)充，以有效控制藥品質(zhì)量,。



 天然來(lái)源的手性藥物經(jīng)試驗(yàn)或充足的文獻(xiàn)證明其構(gòu)型不發(fā)生改變時(shí),，如氨基酸、糖類等,，可以不制訂立體異構(gòu)體雜質(zhì)檢查項(xiàng),；而在性狀項(xiàng)下，采用比旋度范圍作為其光學(xué)特征的控制項(xiàng)目,。



 【含量測(cè)定】在鑒別和檢查項(xiàng)能夠反映手性藥物光學(xué)特征和光學(xué)純度時(shí),，可采用非立體專屬性的測(cè)定方法。



 2.2制劑



 制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)特征和光學(xué)純度控制項(xiàng)目的制訂,，需要考慮制劑過(guò)程,、貯運(yùn)過(guò)程對(duì)手性藥物構(gòu)型的影響。如果上述過(guò)程對(duì)藥物構(gòu)型有影響,，則制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需要制訂立體異構(gòu)體的檢查項(xiàng)目,；反之，可不對(duì)原料藥中引入的立體異構(gòu)體雜質(zhì)進(jìn)行控制,，但需要考慮制訂反映藥物光學(xué)特征的鑒別方法,，尤其在該藥物的消旋體或另一對(duì)映體已上市的情況下，鑒別方法的立體專屬性更為重要,。



 七,、穩(wěn)定性研究



 根據(jù)研究目的不同，穩(wěn)定性研究?jī)?nèi)容可分為影響因素試驗(yàn),、加速試驗(yàn)與長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)等,。手性藥物穩(wěn)定性研究基本原則和方法總體上與普通化學(xué)藥物一致，但手性藥物穩(wěn)定性試驗(yàn)還需重點(diǎn)考察藥物構(gòu)型的穩(wěn)定性,，即通過(guò)設(shè)立適宜的光學(xué)純度檢查項(xiàng)目和采用靈敏、立體專屬性的檢查方法（如立體異構(gòu)體檢查等）,，考察原料藥或制劑中手性藥物的光學(xué)純度或立體異構(gòu)體比例變化情況,。



 一般來(lái)說(shuō)，監(jiān)控手性藥物光學(xué)純度的檢測(cè)指標(biāo)有比旋度及立體異構(gòu)體限度檢查,。通常情況下,，僅采用比旋度作為檢測(cè)指標(biāo)是不完善的，很難準(zhǔn)確地反映構(gòu)型的變化情況,。所以建議采用立體異構(gòu)體限度檢查這一比較靈敏的指標(biāo)進(jìn)行穩(wěn)定性監(jiān)控,，并注意其實(shí)測(cè)數(shù)值的變化情況。另外,，由于立體異構(gòu)體包括對(duì)映異構(gòu)體與非對(duì)映異構(gòu)體,，在選擇監(jiān)控對(duì)象時(shí)要考慮產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),，有時(shí)僅監(jiān)測(cè)對(duì)映異構(gòu)體可能并不全面。對(duì)于含一個(gè)以上手性中心的化合物,，只有當(dāng)所有的手性中心的構(gòu)型均發(fā)生轉(zhuǎn)變時(shí),，才會(huì)得到該手性藥物的對(duì)映異構(gòu)體，而這種可能性相對(duì)較小,。實(shí)際上更可能發(fā)生的情況往往是分子中僅有一個(gè)或兩個(gè)手性中心的構(gòu)型發(fā)生了改變,，從而產(chǎn)生非對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)。所以在這種情況下,，應(yīng)根據(jù)前期的相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù),、理論分析或文獻(xiàn)調(diào)研的結(jié)果，針對(duì)性地監(jiān)測(cè)相應(yīng)的立體異構(gòu)體的含量,，以更準(zhǔn)確地反映該手性藥物構(gòu)型的穩(wěn)定性,。



 影響因素試驗(yàn)一般需進(jìn)行熱、濕,、光照考察,，也可以根據(jù)藥品的性質(zhì)設(shè)計(jì)其他試驗(yàn)，如考察pH值,、氧化等因素對(duì)藥品構(gòu)型的影響,；對(duì)于需要溶解或者稀釋后使用的藥品，如注射用無(wú)菌粉末,，應(yīng)考察臨床使用條件下的穩(wěn)定性,。上述研究中均需注意考察藥物構(gòu)型的變化情況。



 通過(guò)對(duì)手性藥物加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期留樣試驗(yàn)中藥物構(gòu)型穩(wěn)定性的考察,，可以反映藥品在加速和正常貯藏條件下構(gòu)型的穩(wěn)定情況,。



 在制劑的穩(wěn)定性研究中也要注意監(jiān)控活性成分構(gòu)型的變化。即使已證明原料藥的構(gòu)型在一般情況下是穩(wěn)定的,，也不能保證其與制劑中各輔料共存時(shí),，在特定的制劑工藝條件（酸、堿,、溶液狀態(tài),、高溫等）下，構(gòu)型仍然穩(wěn)定,。所以,，仍有必要在制劑中監(jiān)測(cè)其構(gòu)型的穩(wěn)定性。



 八,、 名詞解釋



 絕對(duì)構(gòu)型(Absolute Configuration)：手性分子中,，不對(duì)稱中心上各個(gè)取代基在空間的排列。本文中簡(jiǎn)稱構(gòu)型。



 相對(duì)構(gòu)型（Relative Configuration）：手性分子中,，不對(duì)稱中心的構(gòu)型是通過(guò)與已知構(gòu)型的手性中心或物質(zhì)相比較而得到的,。



 R構(gòu)型(R Configuration)：手性分子中，連接到不對(duì)稱中心碳原子上的不同原子或基團(tuán)a,，b,，c，d,，以a>b>c>d順序排列,。如果從中心碳原子到最小的基團(tuán)d方向，觀察到a→b→c是順時(shí)針?lè)较?，則這個(gè)碳中心的構(gòu)型被定義為R,。



 S構(gòu)型(S Configuration)：手性分子中，當(dāng)連接到不對(duì)稱中心碳原子上的a,，b,，c，d是不同基團(tuán)時(shí),，以a>b>c>d順序排列,。如果從中心碳原子到最小的基團(tuán)d方向，觀察到a→b→c是逆時(shí)針?lè)较?，則這個(gè)碳中心的構(gòu)型被定義為S,。



 注：其它元素如P、S,、N等或其它手征性形式的絕對(duì)構(gòu)型的表示方法請(qǐng)參考相關(guān)專業(yè)書(shū)籍,。



 對(duì)映異構(gòu)體(Enantiomers)：其分子為互相不可重合的鏡象的立體異構(gòu)體。



 非對(duì)映異構(gòu)體(Diastereoisomers)：對(duì)于分子中具有二個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心,，并且其分子互相不為鏡象的立體異構(gòu)體,，常簡(jiǎn)稱為“非對(duì)映體”。



 外消旋體(Racemate)：由等量的兩個(gè)對(duì)映體組成的混合物,。由于其作用相互抵消,，因此表現(xiàn)為不能使偏振光旋轉(zhuǎn)，因而無(wú)光學(xué)活性,。



 左旋體（Levorotatory）：當(dāng)偏振光通過(guò)旋光性物質(zhì)時(shí),，能使偏振光振動(dòng)平面按逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)的立體異構(gòu)體；以（-）表示,。



 右旋體（Dextrarotatory）：當(dāng)偏振光通過(guò)旋光性物質(zhì)時(shí)，能使偏振光振動(dòng)平面按順時(shí)針旋轉(zhuǎn)的立體異構(gòu)體,，以（+）表示,。



 光學(xué)純度(Optical purity)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的旋光度，在兩個(gè)立體異構(gòu)體混合物中，一個(gè)異構(gòu)體所占的百分?jǐn)?shù)?，F(xiàn)在常用對(duì)映體或非對(duì)映體純度來(lái)代替,。







 九、 參考文獻(xiàn)



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